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    从餐巾纸上出现的质粒克隆技术,值得每一位科研人员好好学习!

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      来源:北海市某某企业管理咨询业务部  更新时间:2025-07-11 02:21:54  【打印此页】  【关闭】

    从餐巾纸上出现的从餐质粒克隆技术,值得每一位科研人员好好学习!

    2022-03-24 10:54 · 生物探索

    从餐巾纸上出现的巾纸技术质粒克隆技术:通过DNA连接酶共价连接,筛选具有抗生素耐药表型的上出细菌菌落。

    1972年11月,现的学习在夏威夷檀香山威基基海滩的质粒值一家饭馆中,来自匹兹堡大学、克隆科研华盛顿大学和德克萨斯大学的每位一群科学家(包括Stanley Falkow,Stanley Cohen,好好Herbert Boyer和Charles Brinton)在饭馆的从餐一张餐巾纸上写下了利用新发现的EcoRI来进行质粒克隆试验的疯狂想法(图1)。1973年初,巾纸技术这群科学家们就开始试验验证,上出真正的现的学习试验比想象中还要顺利。科学家们成功将EcoRI内切酶切割产生的质粒值R6-5质粒DNA片段在体外随机结合,然后通过DNA连接酶共价连接,克隆科研将所得混合物中的每位DNA转入氯化钙处理的大肠杆菌中,并在含有抗生素的培养基上筛选具有抗生素耐药表型的细菌菌落。

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    图1 餐桌上提出新想法(图片来源:PNAS)

    正如后来Paul Berg的评论所说:“不需要天才就能发现,如果你能创造出互补的人工末端,两个DNA分子就会结合在一起”。1973年11月,一篇名为“Construction of Biologically Functional Bacterial Plasmids In Vitro”的文章登上PNAS,正式宣布将要影响生物学历史的分子克隆技术的诞生(图2)。

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    图2 研究成果(图片来源:PNAS)

    现代分子克隆技术一般包括5个基本的步骤:载体和插入片段的制备、连接、转化、筛选以及验证。实验过程中的每一步都是分子克隆成功的关键。例如在载体和插入片段的制备阶段,经常会遇到酶切不完全、酶切带型异常等情况,这些看似简单的问题,却也困扰着一代又一代的科研人员。

    赛默飞生命科学小助手中的《核酸探索》系列课程,分为三个模块“核酸样本制备”、“核酸扩增及检测”以及“分子克隆”。不仅仅针对分子克隆的常见问题,其他分子生物学实验中的常见问题,在整套系列课程中都有细致地讲解。在这里你不仅能够和Dr.赛一起学习核酸探索,还能够兑换精美礼品哦~ 

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    《核酸探索》部分精彩课程:

    • 基因组DNA,快到“管”里来 

    • 从DNA到RNA,体外转录全揭秘 

    • 移花接木:分子克隆概述 

    问:Dr.赛,你推荐的赛默飞《核酸探索》系列课程真的很有帮助,不过我在实验中难免还会遇到一些问题,你还有什么珍藏可以分享吗?

    答:你肯定没留意到,点击赛默飞生命科学小助手小程序首页上的‘在线支持’,不仅有小Q智能技术机器人全天帮忙解答常见问题,还可以在工作时间联系Dr.赛人工技术支持,深入探讨技术问题。Dr.赛的宝藏都分享给你了,你可得好好用起来啊。

    除了【赛家课堂】里精彩的在线课程,Dr.赛还有宝藏要分享给大家。点击“赛默飞生命科学小助手”小程序首页上的【在线支持】,不仅有小Q智能技术机器人全天帮忙解答常见问题,还可以在工作时间联系Dr.赛人工技术支持,深入探讨技术问题。大家快快用起来吧!

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    题图来源:Science,仅用于学术交流。

    排版|乔维钧

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